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酶标仪也能“培养”细胞

发布时间:2015-10-27 11:14 |  点击次数:

酶标仪也能“培养”细胞

 

 

 

在生物学、药理学等研究中,细胞活性(viability)和毒性(cytotoxicity)是最常见的细胞实验,目前多数实验室采用的检测方法(如MTTCCK-8等)都是终点法,无法准确地知道药物引起细胞毒性或者抑制细胞增殖的时间点。
配备全新大气控制单元(ACU)的德国高端多功能酶标仪CLARIOstar能精确控制检测腔内的O2CO2浓度以及温度,结合Promega公司的专业试剂盒,可以实现超过72小时不间断地细胞增殖和毒性检测,在一块微孔板上就可以同时完成药物时效和量效的研究。

将荧光素酶NanoLuc和其底物前体一起加到细胞培养基中,后者可以自由穿过细胞膜,在活细胞中被代谢还原成NanaLuc的底物,底物扩散到培养基中后快速被NanoLuc利用产生化学发光信号,信号强度与活细胞的数量成正比。死细胞由于丧失了代谢还原能力,不能产生发光信号(Fig. 1)。

将一种不能穿透细胞膜的DNA染料加到细胞培养基中,当细胞膜遭到破坏(细胞毒性、凋亡等),这种染料可以渗透到细胞内与DNA结合并发出荧光,荧光强度与死细胞的数量成正比(Fig. 2)。

全新ACU的微处理器可以分别对酶标仪腔室内的O2CO2浓度进行0.1-20%的精细调节,从而为任何细胞实验(细胞增殖、细胞毒性等)提供最接近生理的大气环境。ACU内置的气压感应器和声音报警装置可以轻松地监控O2CO2的压力,同时出色的气阀控制确保最小的气体损耗。此外,内置的海拔校正功能进一步确保了气体控制的精确性。全新的ACU用户界面非常友好,通过背光的LCD触摸屏进行设置,最多可以保存10个预设程序,腔室内的气体浓度将以曲线的形式实时地显示在屏幕上。结合ACU和精确的温度控制, CLARIOstar可以为任何类型的细胞提供最适合的生长环境,从而实现长时间的细胞“培养”和不间断检测。